Иммуногематологические исследования что это

Иммуногематологические исследования крови

К иммуногематологическим относятся исследования на определение группы крови, резус-фактора, а также анализ клеточного и гуморального иммунитета.

К иммунологическим исследованиям относятся определение непереносимости тех или иных аллергенов (то есть выявление антител класса G к каждому из них), определение аллоиммунных антител.

Все мы знаем, что в природе существует четыре группы крови. А в чем же состоит принципиальное отличие, на основании которого осуществляется градация?

Собственно, группа крови – это совокупность свойств крови иммуногенетического характера, позволяющая выделять на основании наличия или отсутствия агглютиногенов и антител людей со сходными признаками.

Еще в 1900 году австрийский иммунолог К. Ландштейнер в ходе эксперимента по смешиванию сыворотки крови разных людей отметил, что в некоторых случаев это вызывает свертываемость крови с образованием хлопьев. На основании исследования образцов крови ученый выделил три группы крови. Спустя семь лет, чешский врач Я. Янский выделил четвертую группу.

Для первой группы крови характерно отсутствие антигенов и наличие альфа- и бета- антител. Именно поэтому человек с первой группой крови – идеальный донор.

В крови второй группы содержится антиген А и антитела к агглютиногену В. Как следствие, перелить эту кровь можно тем группам, в которых отсутствует антиген В – то есть первой и второй.

У людей с третьей группой в крови есть антиген В и антитела к агглютиногену А (агглютинин альфа). Соответственно, она может перелита тем группах, у которых нет антиген А. А именно – людям с первой и третьей группой крови.

В четвертой группе крови антител (агглютининов) нет вообще, зато в ассортименте присутствуют антигены. Итак, люди с четвертой группой крови являются идеальными реципиентами, поскольку им может быть перелита кровь любой другой группы. В то же время стать донорами они могут только для собственных «одногруппников».

Антиген Rh может содержаться на поверхности эритроцитов или отсутствовать. В зависимости от этого, говорят о положительном (в случае наличия) или отрицательном (в случае отсутствия) резус-факторе.

Резус-фактор не может появиться или исчезнуть в течение жизни, не зависит от группы крови человека или каких-либо внешних факторов.

Определить резус-фактор можно уже на ранних сроках внутриутробного развития плода, а в период новорожденности соответствующий белок при его наличии определяется в больших количествах.

Определение резус-фактора в клинической практике важно для того чтобы избежать возникновения резус-конфликта в процессе переливания крови, а также важно для проведения терапии во время беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным ребенком.

Антитела к резус-факторы, а также иным эритроцитарным антигенам могут возникнуть в крови человека только при определенных условиях, к которым относятся переливание донорской крови, являющейся иммунологически несовместимой, или в процессе беременности, когда плод наследует чужеродные для матери антигены отца, проникающие через плацентарный барьер в ее кровоток.

Иммунологи различают пять антигенов, основным из которых считается D(Rh), который, как правило, подразумевается под резус-фактором. Однако помимо D(Rh) существуют и другие эритроцитарные антигены, определение которых является клинически значимым, так как к ним также может возникать сенсибилизация, провоцирующая развитие осложнений в ходе переливания донорской крови или в периоде гестации.

Гемолитическая болезнь плода обусловлена иммунологическим конфликтом по эритроцитарным антигенам: по D, C, c, d, e-, а также ABO, Kell, Duffy, Kidd, M-антигенам. Теоретически любой из перечисленных антигенов вызывает при попадании в кровь матери образование антител, хотя на практике в подавляющем большинстве случаев несовместимость развивается по D-резус-антигену.

Такие антитела определяются очень часто при наличии пищевой аллергии. Однако эти же иммуноглобулины обнаруживаются у совершенно здоровых людей в тех случаях если они употребляют тот или иной продукт в больших количествах. Таким образом, однозначного ответа на вопрос, имеет ли определение этих антител в крови человека клиническую значимость при диагностике пищевой аллергии, пока не существует.

По большей части, такое исследование проводится в качестве дополнительного для включения (исключения) в диету пациента определенных компонентов. Расшифровка результатов анализа должна производиться врачом, который будет рассматривать е в совокупностями с иными исследованиями, опираясь на анамнез и данные о клинической картине заболевания, с учетом индивидуальных особенностей пациента.

Источник

Опыт использования различных методов иммуногематологического тестирования крови доноров и реципиентов в условиях многопрофильного стационара

И.Я. Голоусиков¹, В.В. Данилец¹, О.Г. Панасенкова¹, Т.А. Правова1, Н.Г. Дашкова²

¹ ГБУЗ «Городская больница № 3 ДЗМ», г. Москва

² ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Минздрава России, г. Москва

Трансфузиология №2, 2015

Резюме

Иммуногематологические исследования образцов крови доноров и реципиентов в условиях многопрофильного стационара целесообразно проводить с использованием высокочувствительных и высокоспецифичных иммуногематологических методов, что обеспечит высокий уровень иммуногематологической безопасности гемокомпонентной терапии и позволит минимизировать риск посттрансфузионных реакций. Представлены данные сравнительного тестирования 20 326 образцов крови доноров и реципиентов различными методами иммуногематологического обследования: гемагглютинация на микропланшетах, твердофазная технология и гелевая технология с использованием карт различных производителей. При использовании твердофазной технологии «Capture-R» чаще выявлялся антиген А2 в группе наблюдения АВ(IV), а также Dw в группе наблюдения Rh – как у доноров, так и у реципиентов.

Ключевые слова: группы крови системы АВ0, резус-фенотип, донор, реципиент.

Введение
Проблеме оптимизации и улучшения качества иммуногематологического тестирования больных перед трансфузией донорских гемокомпонентов в отечественном здравоохранении уделяется повышенное внимание. Принятый в апреле 2013 года приказ Минздрава России № 183н «Об утверждении Правил клинического использования донорской крови и (или) ее компонен- тов» [1] внес существенные дополнения в алгоритм предтрансфузионного тестирования, регламентируя подбор идентичных эритроцитов донора и реципиента по 10 антигенам. В обязательном порядке регламентируется также скрининг аллоиммунных антител у реципиентов с использованием панели стандартных эритроцитов. Новые правила, расширяя спектр и увеличивая количество исследований, диктуют необходимость сравнения различных технологий и выбора наиболее чувствительных, информативных, экономически доступных методов иммуногематологического тестирования. В част- ности, представляет интерес сравнение использования твердофазной и ге- левой технологий. Единичные исследования, посвященные сопоставлениям различных технологий тестирования, проводились в США [2]. Сведения о подобного рода исследованиях в отечественной литературе отсутствуют.

Цель настоящей работы – оценить диагностическую значимость технологии гемагглютинации в микропланшетах и твердофазной технологии «Сapture» компании Immucor (США) и сравнить с двумя гелевыми технологиями – Bio-Rad (США) и Grifols (Испания).

Материалы и методы

За период с января по декабрь 2013 года на анализаторе «Galileo Neo» Immucor (CША) были проведены иммуногематологические исследования 20 326 образцов крови. Параллельно гелевыми методами Bio-Rad (США) и Grifols (Испания) протестировано 7073 образца крови доноров реципиентов, беременных женщин и рожениц. Исследования проводили в 2 этапа. Первый этап включал определение групп крови по системе АВ0 с идентификацией подгрупп (А2, В2), резус-принадлежности, выявление слабого варианта анти- гена D – DW и экстраагглютининов анти-А1. Второй этап заключался в проведении скрининга антиэритроцитарных аллоантител различными методами и установлении их специфичности. При работе методами Immucor (США) использовался полностью автоматический анализатор «Galileo Neo», моно- клональные сыворотки двух разных марок – «ImmuClon» и «NOVACLON» для определения антигенов системы АВ0, Rh, Kell, микропланшеты «Сapture-R» для выявления антиэритроцитарных антител, определения титра, стандартные эритроциты «Referenscells A (1), B» и другие материалы, предусмотренные технологией, в том числе контрольные.

Результаты

Результаты параллельного тестирования образцов крови по системе АВ0 и резус с использованием твердофазной и гелевой технологий приведены в табл. 1.
Как показали исследования, частота выявления антигена А2 и антигена В2 в группах наблюдений А (II) и В (III) при использовании всех трех методов существенно не различалась. Выявление антигена А2 в группе наблюдения АВ (IV) при использовании твердофазного метода было чаще, чем с использованием гелевой технологии (х² = 4,46, p

Выявление и подтверждение слабого варианта антигена D особенно важно при исследовании образцов крови доноров. Следует напомнить, что при определении резус-принадлежности у доноров и выявлении слабых вариантов антигена D донорские эритроциты относят к резус-положительным, что позволяет избежать сенсибилизации при переливании таких эритроцитсодержащих сред резус-отрицательным реципиентам [3, 4, 5, 6, 7]. Обращает на себя внимание тот факт, что при использовании твердофазной технологии в образцах крови с подгруппой A2B (IV) в 7 случаях, в том числе у 3 доноров, выявлены экстраагглютинины анти-А1, тогда как с помощью технологии Bio-Rad экстраагглютинины обнаружены только в одном образце, а с использованием Grifols не выявлены ни в одном образце.

Результаты скрининга антител при параллельном тестировании образцов крови тремя методами приведены в табл. 2.

Как следует из табл. 2, антиэритроцитарные аллоантитела были выявлены у 0,6–0,9% обследованных лиц. Фенотипирование антигенов эритроцитов и выявление аллоиммунных антиэритроцитарных антител – необходимые составляющие для обеспечения иммуногематологической совместимости крови донора и реципиента при гемотрансфузиях [1, 3, 4, 6–8]. Ошибки при проведении исследований антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител могут быть результатом как нарушения технологии, так и применения неадекватных схем диагностики [4, 6, 9].

Неправильное заключение о наличии или отсутствии антигенов и аллоиммунных антител у доноров и реципиентов повышает риск развития пост-трансфузионных осложнений гемолитического типа [5, 9]. Выбор высокочувствительных и высокоспецифичных иммуногематологических методов позволит обеспечить высокий уровень иммуногематологической безопасности гемокомпонентной терапии и минимизировать риск посттрансфузионных реакций [7, 10].

Заключение

Современные автоматизированные варианты классических методов иммуногематологического тестирования (гемагглютинация на микропланшетах, твердофазная технология) и гелевые технологии эффективно используются при исследовании крови доноров и различных категорий реципиентов. Полученные результаты показали преимущество технологии Immucor при выявлении экстраагглютининов анти-А1 у доноров и реципиентов подгрупп А2В (IV), а также антигена DW по сравнению с гелевыми технологиями.

Литература

1. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 02.04.2013 г. № 183н «Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) ее компонентов». – М., 2013. – 26 с.

2. Issitt P.D., Anstee D.J. Applied Blood Group Serology. – 4-th ed. – Durham, NC, USA: Montgomery Sc. Publ., 1998. – 1208 p.

3. Иммуносерология (нормативные документы) / Составит. А.Г. Башлай, С.И. Донсков. – М.:ВНИИТИ, 1998. – 196 с.

4. Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека: Руководство по иммуносерологии. – М.: ИП Скороходов В.А., 2011. – 1016 с.

5. Косяков П.Н. Изоантигены и изоантитела человека в норме и патологии. – М.: Медицина, 1974. – 360 с.

6. Рагимов А.А., Дашкова Н.Г. Основы трансфузионной иммунологии. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. – С. 279–283.

7. Скудицкий А.Е. Профилактика посттрансфузионных осложнений, обусловленных групповыми антигенами эритроцитов: автореф. дис. … канд. мед. наук. – М., 2001. – 26 с.

8. Weisbach V., Kohnhauser T., Zimmerman R. et al. Comparison of the performance of microtube column systems and solid-phase systems and the tube low-ionic-strength solution additive indirect antiglobulin test in the detection of red cell alloantibodies // Transfus. med. – 2006. – Vol. 16, № 4. – P. 276–284.

9. Минеева Н.В. Антитела к антигенам эритроцитов и методы их выявления: Методические рекомендации. – СПб., 2000. – 14 с.

10. Умнова М.А. Изосерологические системы крови человека и их значение в трансфузиологии // Групповые системы крови и гемотрансфузионные осложнения / Под ред. проф. М.А. Умновой. – М.: Медицина, 1989. – С. 5–30.

Источник

Иммуногематологические исследования крови

С помощью иммуногематологических исследований определяют группу крови, резус-фактор и выявляют антитела к различным аллергенам.

Провести иммуногематологическое исследование необходимо:

Для чего проводят иммунофенотипирование эритроцитов

В основе анализа — реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови. Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения

Анализ назначают при:

Лейкоцитарная формула (дифференцированный подсчёт лейкоцитов, лейкоцитограмма)

Включает в себя определение общей концентрации лейкоцитов крови и процентного соотношения основных субпопуляций лейкоцитов. В результате автоматизированного подсчёта лейкоцитарной формулы гематологический анализатор выделяет 5 субпопуляций лейкоцитов: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы, в большинстве случаев этой информации вполне достаточно.

Общий анализ крови совместно с лейкоцитарной формулой широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.

Исследование лейкоцитарной формулы имеет большое значение в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также оценке тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.

Подготовка к сдаче анализа

Кровь забирается из вены в области локтевого сгиба. Чтобы избежать искаженных результатов, перед анализом следует соблюсти определенные правила:

Источник